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2021-08-02
蛋白轉(zhuǎn)印的方法蛋白轉(zhuǎn)印可選擇傳統(tǒng)濕轉(zhuǎn)、半干轉(zhuǎn)或快速半干轉(zhuǎn)方法。濕轉(zhuǎn)系統(tǒng)：適用于大多數(shù)各種分子量的常規(guī)蛋白轉(zhuǎn)印。轉(zhuǎn)印過(guò)程中凝膠和膜被浸入充滿轉(zhuǎn)印緩沖液的槽中。半干轉(zhuǎn)系統(tǒng)：凝膠和膜被夾在預(yù)先潤(rùn)濕緩沖液的濾紙之間，濾紙與平板電極直接接觸。半干轉(zhuǎn)系統(tǒng)的安裝使用比濕轉(zhuǎn)簡(jiǎn)單?？焖俎D(zhuǎn)印系統(tǒng)：快速轉(zhuǎn)印系統(tǒng)是最近發(fā)展出來(lái)的技術(shù)，使用專(zhuān)用設(shè)備、專(zhuān)用濾紙及專(zhuān)用緩沖液來(lái)快速有效地轉(zhuǎn)印蛋白。通常濾紙和濕潤(rùn)的膜預(yù)先放在一次性包裝中，簡(jiǎn)化了轉(zhuǎn)印“三明治”的組裝。轉(zhuǎn)印緩沖液轉(zhuǎn)印緩沖液包含強(qiáng)導(dǎo)電性化學(xué)緩沖試劑...2021-07-30
中山大學(xué)藥學(xué)院于7月27日發(fā)布通報(bào)，該院2021年7月27日發(fā)生一起實(shí)驗(yàn)安全事故，實(shí)驗(yàn)=室在清理通風(fēng)柜時(shí)發(fā)現(xiàn)之前畢業(yè)生遺留在燒瓶?jī)?nèi)的未知白色固體，一博士研究生用水沖洗時(shí)發(fā)生炸裂，炸裂產(chǎn)生的玻璃碎片刺破該生手臂動(dòng)脈血管，送醫(yī)救治傷情得到控制，無(wú)生命危險(xiǎn)。與實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)老師溝通分析，導(dǎo)致炸裂的未知白色固體中可能含有氫化鈉或氫化鈣，遇水發(fā)生劇烈反應(yīng)而炸裂。實(shí)驗(yàn)室的瓶瓶罐罐清洗是科研工作者最日常的工作，但是，如果你并不確定瓶?jī)?nèi)裝的是什么東西，千萬(wàn)不要隨意就拿去清洗！有些化學(xué)品遇水會(huì)發(fā)生...2021-07-29
研究人員發(fā)現(xiàn)，盡管大腦通過(guò)中腦產(chǎn)生5-羥色胺的神經(jīng)元來(lái)調(diào)節(jié)快感和饑餓感的進(jìn)食，但每種進(jìn)食方式都是由自己獨(dú)立的電路連接的，不影響其他類(lèi)型的進(jìn)食方式。美國(guó)疾病控制與預(yù)防中心(CentersforDiseaseControlａndPrevention)的數(shù)據(jù)顯示，無(wú)論是由饑餓還是愉悅引起的暴飲暴食，通常都會(huì)導(dǎo)致肥胖。美國(guó)約42%的成年人都患有肥胖癥。一個(gè)由貝勒醫(yī)學(xué)院(BaylorCollegeofMedicine)的研究人員領(lǐng)導(dǎo)的國(guó)際研究小組在動(dòng)物模型上研究了大腦是如何調(diào)節(jié)饑餓或其...2021-07-29
基本原理：外源目的DNA與載體分子的連接稱為DNA重組，重組的DNA稱為重組體或重組子。研究中需要克隆或表達(dá)的基因?yàn)橥庠碊NA，載體是指能夠攜帶外源基因進(jìn)入受體細(xì)胞，并在其中進(jìn)行擴(kuò)增或誘導(dǎo)外源基因表達(dá)的工具，其中質(zhì)粒載體最為常用。質(zhì)粒是獨(dú)立于細(xì)菌染色體外具有自我復(fù)制的DNA分子。所有的質(zhì)粒都有復(fù)制子、選擇性標(biāo)志和多克隆位點(diǎn)3個(gè)共同的特性。質(zhì)粒載體的選擇包括載體的大小、載體拷貝數(shù)、多接頭以及篩選插入片段的能力，pcDNA3.1（+/-）是比較常用的真核表達(dá)載體?；静襟E：1、目...2021-07-29
CCK8全稱CellCountingKit-8，是一種基于WST-8（化學(xué)名為2-（2-甲氧基-4-硝基苯）-3-（4-硝基苯）-5-（2,4-二磺基苯）-2H-四唑單鈉鹽）的應(yīng)用于細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性的快速、高靈敏度檢測(cè)試劑盒。其工作原理類(lèi)似于MTT，在電子耦合試劑存在的情況下，WST-8可以被線粒體內(nèi)的脫氧酶還原生成高度水溶性的橙黃色的甲臜產(chǎn)物（formazan）。顏色的深淺與細(xì)胞的數(shù)量有關(guān)。CCK8法在藥物篩選、細(xì)胞增殖測(cè)定、細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)、腫瘤藥敏試驗(yàn)以及生物因子的活性檢...2021-07-28
基本原理細(xì)胞凍存時(shí)保存細(xì)胞的最基本方法，當(dāng)不加保護(hù)劑直接凍存細(xì)胞時(shí)，細(xì)胞內(nèi)和外環(huán)境中的水會(huì)形成冰晶，從而引起細(xì)胞死亡。因此，正常情況下凍存細(xì)胞，通常會(huì)向培養(yǎng)液中加入保護(hù)劑，使用逐步降低溫度的方法，以減少凍存過(guò)程中細(xì)胞內(nèi)冰晶形成、保護(hù)細(xì)胞。注意事項(xiàng)1、凍存細(xì)胞選擇細(xì)胞增殖旺盛、情況穩(wěn)定、無(wú)污染、處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞。2、實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程必須遵循無(wú)菌操作。3、細(xì)胞凍存液的配方應(yīng)根據(jù)細(xì)胞的類(lèi)型進(jìn)行調(diào)整，摸索對(duì)應(yīng)細(xì)胞最適的配方。4、細(xì)胞凍存過(guò)程，降溫速率要小，遵循慢凍原則，可借助程序降溫...2021-07-27
41、跑電泳的時(shí)候配的膠總是“縮”是什么原因呢？是有的成分不對(duì)嗎？答：沒(méi)什么問(wèn)題，就是你膠里的水分被蒸發(fā)了。過(guò)夜時(shí)拿保鮮膜包起來(lái)，在里面加點(diǎn)水保持濕度就可以了；也可能母液（30%聚丙酰胺）有問(wèn)題，你可以重新配制一份觀察；能夠替換的試劑，盡量換一下，選用好的試劑。42、蛋白質(zhì)的分子量跨度很大，如要分離小21KD，中至66KD，大至170KD，可以一次做好嗎？答：這么廣的分布不好轉(zhuǎn)移，一般建議：21kd和66kd可以一起轉(zhuǎn)，12％SDS-PAGE，濕轉(zhuǎn)120mA，45-60min...- 移液器
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